一、服务简介
针对AB品系斑马鱼，提供基因组目标区域1 bp-5000 bp序列的精准敲入定制服务，支持报告基因、标签蛋白、调控元件及功能突变片段等多种序列的定点整合，可满足基因表达定位、调控元件功能验证、蛋白互作研究及药物筛选等实验需求。
二、服务流程
- 1. 靶点设计
- 2. 同源重组载体构建
- 3. 胚胎显微注射
- 4. F0代初筛与嵌合体验证
- 5. F0代繁育与传代
- 6. F1代基因型鉴定
- 7. 模型交付
三、服务周期
插入片段≤3000bp：6 - 9 个月
插入片段 3001 - 5000bp：8 - 10 个月
整体周期含斑马鱼性成熟培育，最短不低于 6 个月。
四、服务价格
低至31980元起，价格根据插入片段长度灵活定制，详询客服获取专属报价。
五、结果交付
- 1. 提供至少1对可稳定遗传的F1代杂合子模型成鱼，品系来源独立；
- 2. 完整的项目实验报告（包含靶点设计、载体序列信息、显微注射记录、巢式PCR/测序鉴定数据等）；
六、核心优势
- 定点精准整合：基于同源重组策略实现序列位点的定向插入，确保插入序列完全匹配预设方案
- 适配多种片段长度：支持从短序列到≤5 kb大片段的高效敲入，满足不同实验设计需求
- 低脱靶与低副效应：采用 Cas9n技术，大幅降低非特异性切割、随机整合及基因组重排风险
- 可稳定遗传：整合至基因组，可稳定传代使用。
七、质量标准
- F0代：巢式PCR扩增 + Sanger测序，确保目标序列插入；
- F1代：深度基因型测序验证，筛选目标序列完整、定点整合无突变、无随机插入的杂合子个体。
八、应用前景
- ・ 基因时空表达定位（如 GFP 荧光标记插入）
- ・ 蛋白功能域融合与互作分析
- ・ 调控元件功能验证
- ・ 人类疾病斑马鱼模型构建
- ・ 药物筛选与临床前评价
九、案例展示
本实验室自主研发RecOFAR 介导基于双切口的斑马鱼多位点高效基因敲入（KI）技术，采用双切口+重组因子强化策略，可稳定实现5.5kb超长DNA片段的精准定点插入（KI），效率较传统方法提升5倍，且靶向/脱靶Indel显著降低，已在多物种验证高效、安全、精准。
RecOFAR 介导基于双切口的斑马鱼多位点高效基因敲入（KI）
