一、服务简介
以AB品系斑马鱼为模型，基于CRISPR-Cas9 技术构建目标基因的Indel 突变，通过筛选与繁育获得可稳定遗传的基因敲除品系，可用于基因功能验证、表型关联分析等研究。
二、服务流程
- 1. sgRNA设计与优化
- 2. 注射体系配制（Cas9蛋白/mRNA+sgRNA）
- 3. 胚胎显微注射
- 4. F0代突变体初筛
- 5. 传代繁育与F1代基因型筛选
- 6. 模型交付与数据整理
三、服务价格
- 1st独立突变类型：¥ 9980
- 2nd独立突变类型：¥ 5000
- 3rd独立突变类型：¥ 2000
注：1st、2nd和3rd为同一基因的不同Indel突变类型，支持多类型平行构建以保障结果稳定性。
四、结果交付
- 1. 至少1对可稳定遗传的F1代杂合子成鱼，携带Indel突变；
- 2. 完整的实验数据报告（包含sgRNA设计及质控、各代测序鉴定结果及实验原始数据等）。
五、核心优势
- 稳定可遗传：基因组水平的Indel突变可稳定遗传至后代，适合长期性研究
- 编辑特异性高：sgRNA经生物信息学设计优化，有效降低脱靶风险
- 功能敲除可靠：通过引入移码突变提前终止蛋白翻译，实现目标基因的功能失活
- 质控体系完善：通过F0代初筛与F1代测序双重验证，确保突变结果可靠
六、质量标准
- F0代验证：PCR扩增+ Sanger测序，确认目标位点成功诱导Indel突变。
- F1代验证：测交后代测序验证，确保突变位点有效，无额外非预期突变或无意义突变
七、应用前景
- ・ 基因功能缺失性研究
- ・ 人类疾病模型构建
- ・ 遗传调控通路机制解析
- ・ 药物靶点验证与临床前高通量筛选
- ・ 基因治疗与精准医疗转化应用研究
八、案例展示
本案例成功构建cdk13敲除斑马鱼疾病模型，完整实现从靶点设计、基因编辑、品系建立到表型解析与机制研究的全流程服务，为先天性心脏病等疾病机制研究、药物筛选与基因功能验证提供标准化、可复用的动物模型解决方案。
畸形程度评定标准
斑马鱼 8 hpf~168 hpf 发育情况明场观察
（a）斑马鱼8hpf~168hpf畸形情况代表图。红色箭头所指为畸形区域，比例尺长度为500um；
（b）畸形情况统计堆积柱状图
（c）斑马鱼72hpf~168hpf体长统计，差异学结果为cdk13+/-（蓝色）、cdk13-/-（粉红）组分别与WT组的比较，各组数据以平均数±标准误（mean±SEM），*：p＜0.05，**：p＜0.01，***：p＜0.001，****：p＜0.0001基于ANOVA分析，未标明处为无统计学差异（ns），n=25
