以AB品系斑马鱼为模型,基于CRISPR-Cas9 技术构建目标基因的Indel 突变,通过筛选与繁育获得可稳定遗传的基因敲除品系,可用于基因功能验证、表型关联分析等研究。
一、服务流程
- 1. sgRNA设计与优化
- 2. 注射体系配制(Cas9蛋白/mRNA+sgRNA)
- 3. 胚胎显微注射
- 4. F0代突变体初筛
- 5. 传代繁育与F1代基因型筛选
- 6. 模型交付与数据整理
三、服务价格
- 1st独立突变类型:¥ 9980
- 2nd独立突变类型:¥ 5000
- 3rd独立突变类型:¥ 2000
注:1st、2nd和3rd为同一基因的不同Indel突变类型,支持多类型平行构建以保障结果稳定性。
四、结果交付
- 1. 至少1对可稳定遗传的F1代杂合子成鱼,携带Indel突变;
- 2. 完整的实验数据报告(包含sgRNA设计及质控、各代测序鉴定结果及实验原始数据等)。
五、核心优势
- 稳定可遗传:基因组水平的Indel突变可稳定遗传至后代,适合长期性研究
- 编辑特异性高:sgRNA经生物信息学设计优化,有效降低脱靶风险
- 功能敲除可靠:通过引入移码突变提前终止蛋白翻译,实现目标基因的功能失活
- 质控体系完善:通过F0代初筛与F1代测序双重验证,确保突变结果可靠
六、质量标准
- F0代验证:PCR扩增+ Sanger测序,确认目标位点成功诱导Indel突变。
- F1代验证:测交后代测序验证,确保突变位点有效,无额外非预期突变或无意义突变
七、应用前景
- ・ 基因功能缺失性研究
- ・ 人类疾病模型构建
- ・ 遗传调控通路机制解析
- ・ 药物靶点验证与临床前高通量筛选
- ・ 基因治疗与精准医疗转化应用研究
八、案例展示
本案例成功构建cdk13敲除斑马鱼疾病模型,完整实现从靶点设计、基因编辑、品系建立到表型解析与机制研究的全流程服务,为先天性心脏病等疾病机制研究、药物筛选与基因功能验证提供标准化、可复用的动物模型解决方案。

畸形程度评定标准

斑马鱼 8 hpf~168 hpf 发育情况明场观察
(a)斑马鱼8hpf~168hpf畸形情况代表图。红色箭头所指为畸形区域,比例尺长度为500um;
(b)畸形情况统计堆积柱状图
(c)斑马鱼72hpf~168hpf体长统计,差异学结果为cdk13+/-(蓝色)、cdk13-/-(粉红)组分别与WT组的比较,各组数据以平均数±标准误(mean±SEM),*:p<0.05,**:p<0.01,***:p<0.001,****:p<0.0001基于ANOVA分析,未标明处为无统计学差异(ns),n=25






