一、服务简介
以AB品系斑马鱼为实验材料，通过外源注射体外转录mRNA，完成目标基因在胚胎/幼体阶段的瞬时过表达，提供标准化基因表达水平短期上调模型，满足短期高表达科研需求。
二、服务流程
- 1. 体外克隆目标基因 CDS 序列
- 2. 体外转录合成并修饰获得高纯度功能性mRNA
- 3. mRNA 纯化后显微注射至单细胞期受精卵
- 4. 胚胎培养、存活率统计及目的基因表达效率检测
- 5. 整理实验数据并交付报告
（若客户提供现成模板，可省略克隆步骤）
三、服务周期
全程实验周期约为1 个月，注射后 12-24h 可检测目标蛋白表达，后续1-2 周为表型观察的关键窗口。
四、服务价格
单个基因瞬时过表达模型构建：¥10980元/个
五、结果交付
最终交付完整的斑马鱼基因瞬时过表达实验数据报告，包含 mRNA 质控数据（浓度、完整性及纯度检测结果）、胚胎注射及存活率统计、目标基因表达效率检测结果、表型观察记录与分析，以及全套实验原始数据等。
六、核心优势
- 无基因组整合：不改变斑马鱼基因组序列，无遗传背景干扰
- 周期高效：约1 个月完成全流程，快速获得实验模型
- 表达强度可控：可通过调整mRNA注射剂量，精准调控目标蛋白的表达水平
- 操作灵活：支持单基因或多基因协同过表达研究
七、质量标准
- mRNA 质控：琼脂糖凝胶电泳验证完整性，OD260/280比值为1.8-2.0，确保纯度符合实验要求。
- 表达效率验证：注射后24-48h，目标基因的mRNA或蛋白表达水平上调约3倍以上（RT-qPCR验证）。
八、应用场景
- ・ 基因功能的快速增益验证
- ・ 蛋白表达与表型的瞬时关联分析
- ・ 无需获得稳定遗传的短期基因高表达研究
- ・ 模式生物基因功能的初步探索
九、案例展示
图示: syt4基因在斑马鱼中过表达
（F）syt4 capped mRNA胚胎注射过表达48h后各组过表达情况确认的RT-qPCR结果比较图。（G）过表达胚胎存活数与畸形数统计以及72hpf的0ng/μl和500ng/μl过表达的白光表型图，其中500ng/μl组共统计了15尾，有6尾出现畸形。显著性：ns=无显著差异；=P<0.05；=P<0.01；=P<0.001。
